Хетчинг что это

О чем говорят энциклопедии

Однако на начальной стадии развития эмбрион заключен в специальную гликопротеиновую оболочку (Zona pellucida). Говоря коротко, ее предназначение — удержание всех клеток зародыша в одном месте и защита яйцеклетки от многократного проникновения сперматозоидов. Также она служит своеобразным маяком для клеток спермы, показывающим путь к заветной цели. Спустя несколько дней (обычно 5) эмбрион покидает ее — это и есть хэтчинг (от английского слова hatching — вылупление).

механическим, когда он в форме бластоцисты как бы надувается от наполнения своей полости водой и разрывает оболочку изнутри;
химическим, когда с выделением специального фермента бластоциста вылезает из оболочки через разжиженное отверстие.

Раннее освобождение из Zona pellucida чревато развитием однояйцевых близнецов.

Виды лазерного хетчинга

Метод применяется широко и дает хорошие результаты, так как он идеально подходит для выполнения микроманипуляций.

Лазерный хетчинг может происходить двумя путями:

Бесконтактный метод. Луч направляется по касательной к эмбриону, при этом минимизируется действие на эмбрион, но сохраняются эффекты сглаживания и истончения оболочки.

Контактный метод. «Выжигается» сквозной тоннель в оболочке, не достигая клеток эмбриона.

Все манипуляции проводятся на точном лазерном аппарате с цифровым управлением. Лазерный хетчинг – очень точный процесс, благодаря чему заслужил доверие со стороны медиков. Отсутствуют данные об отрицательном влиянии процедуры лазерного хэтчинга на результаты ЭКО.

Многоплодная беременность

Многоплодная беременность — зачатие, во время которого одновременно в полости матки развивается два и более плода.

преждевременные роды;
низкая масса тела малыша при рождении;
преэклампсии (болезнь, возникающая на поздних сроках или во время родов, вызывающая критическое увеличение артериального давления, которое создает угрозу жизни матери и ребенка);
рост перинатальной заболеваемости у новорожденных (асфиксия, внутриутробная инфекция, пороки развития, внутричерепная травма и т.д.)

Такие случаи также требуют оперативного вмешательства и продолжительного лечения в стационаре, как матери, так и эко ребенка.

Как избежать

Медицина изучает все факты. По данным исследований в 40% случаев многоплодной беременности, один или более малышей не переживают неонатальный период. В зрелом возрасте у них диагностируются хронические физические и/или неврологические осложнения, связанные с преждевременными родами. В основном такую мрачную перспективу рисуют пациенткам врачи, забывая, что при естественном зачатии для малышей существуют аналогичные риски. Единственный верный способ избежать риска многоплодной беременности — уменьшение количества переносимых эмбрионов. При ЭКО существуют ограничения на подсадку не более 2-х эмбрионов. Женщине после 35 лет переносят три. А вот при использовании метода искусственной инсеминации она получает сильные гормональные препараты, которые вызывают активную стимуляцию яичников. В этом случае врач не сможет угадать количество имплантированных эмбрионов и только трансабдоминальный метод диагностирует многоплодие.

Что дает криоконсервация?

- Гиперстимуляции яичников способствуют три момента:
  - Доза гонадотропинов. Чем выше доза, тем выше риск.
  - Выбор триггера овуляции. Триггер может быть с хорионическим человеческим гонадотропином (ХГЧ) и с агонистом гонадолиберина. В первом случае препарат продолжает стимулировать яичники в течение недели, во втором двое суток. Чем дольше стимулирует, тем выше риск.
  - При наступлении беременности при «свежем» переносе, эмбрион начинает выделять ХГЧ, который вновь начинает стимулировать яичники.
- При криоконсервации всех эмбрионов можно избежать II и III пунктов. И это позволяет свести риск синдрома гиперстимуляции практически к нулю у любой женщины
После стимуляции и пункции получают несколько яйцеклеток и эмбрионов. Только 4 из 10 яйцеклеток могут дать эмбрион. Шансы эмбриона на имплантацию сильно зависят от возраста женщины и колеблются от 1-2 % в самом худшем случае до 65-70 в самом лучшем. Раньше не было эффективной криоконсервации и качество эмбрионов было не высоким, поэтому переносили сразу по несколько эмбрионов, чтобы увеличить шансы на беременность. Сегодня, во-первых, шансы эмбрионов на имплантацию существенно выросли, а криоконсервация позволяет сохранять эмбрионы без потери их качества. Можно провести одну стимуляцию яичников, одну пункцию (а это самые неприятные и опасные этапы ЭКО), но сделать при необходимости несколько переносов эмбрионов . Т.е. если при переносе одного эмбриона беременность не наступила, в следующем цикле моно разморозить следующий эмбрион и перенести его. Шансы на беременность складываются каждый раз. Так в возрасте до 35 лет шансы на беременность при получении 4 эмбрионов будут 80-90%, а при наличии 8 эмбрионов 99%.
Если получено достаточное количество эмбрионов, то после одной стимуляции и пункции можно родить не только одного, но даже двух или трех детей, оттаяв криоконсервированные эмбрионы.
Во время стимуляции яичников главная задача — это получить яйцеклетки, об эндометрии думают во вторую очередь. На фоне стимуляции часто возникает ситуация избыточного или недостаточного действия эстрогенов на эндометрий, кроме того может наблюдаться ранний подъем прогестерона. Эти изменения снижают не только шансы эмбриона на имплантацию, но и увеличивают риск осложнений при беременности. При переносе оттаянных эмбрионов эти негативные явления отсутствуют.

Стоимость криопереноса составляет 1/3-1/4 от стоимости программы ЭКО

Вспомогательный хэтчинг или последняя надежда для беременности

Хэтчинг, в первую очередь, естественный процесс при оплодотворении. Но врачам под силу провести процедуру искусственно. Это называется вспомогательный хэтчинг. При ЭКО это последний шанс на оплодотворение, гарантирующий 35% успеха. Суть — в искусственном разрыве блестящей оболочки, заключающей эмбрион. Химический

Сначала эмбрион извлекается и фиксируется специальной пипеткой. Затем при помощи очень тонкой полой иглы наносится кислотный раствор, разжижающий внешнюю оболочку. Врач дожидается, когда раствор образует небольшое отверстие. Когда оно образовалось, эмбрион промывают и помещают в инкубатор. После выведения зародыша выполняется процедура пересадки его в матку, где он имплантируется и начнет дальнейшее развитие. Этот способ не рекомендован к применению, поскольку используемый препарат помимо малого процента успешного рождения ребенка токсичен для эмбриона, участвующего в процессе.

Ферментный

Используются вещества, содержащие специальные ферменты. Принцип не отличается от предыдущего. Воздействуя, они так же разжижают оболочку, и позволяют эмбриону «проклюнуться».

Механический

Беря в руки микроинструменты, специалисты разрывают оболочку. Выполнять процедуру микроинструментами рискованно: могут повредиться клетки зародыша. Наиболее безопасным считается использовать пьезо-механическую машину и настроить ее вибрацию на максимальную частоту. Это оставляет небольшие углубления на стенке Zona Pellucida. Чтобы эмбрион смог выйти из нее без проблем, нужно сделать от 5 до 8 углублений.

Лазерный

Какие могут быть осложнения

Несмотря на высокую точность используемого оборудования, известны случаи осложнений, когда происходило повреждение эмбриона. Однако вероятность этого чрезвычайно мала и составляет около 1%. В остальных случаях у благополучно рожденных детей не наблюдалось никаких отклонений от нормы.

Предлагаем вам также посмотреть интересное видео о том, как происходит хэтчинг бластоцисты:

Ученые стремятся повысить эффективность ЭКО, поэтому при проведении обследований было установлено, что неспособность бластоцист выйти из прозрачной оболочки из-за ее утолщения или затвердевания может быть одной из причин неудачной имплантации. Именно поэтому в 1990 г. была изобретена новая технология, которая применяется в протоколе ЭКО и ИКСИ —хетчинг эмбрионов.

Особенности и возможные способы применения методики

Вспомогательный хетчинг в центрах ЭКО начали применять еще в начале 90-х годов прошлого столетия, с тех пор с развитием современных технологий процедура была существенно усовершенствована. Так, на сегодняшний день существует несколько методик проведения данной манипуляции, каждая из которых имеет свои особенности:

Механический хэтчинг

Эта методика представляет собой механическое воздействие на прозрачную оболочку эмбриона и носит название частичного рассечения. Специальной микроиглой блестящую оболочку дважды прокалывают под определенным углом, благодаря чему формируется узкая прорезь, через которую бластоциста может быстрее выйти своей «скорлупы».

Химический хэтчинг

Суть данной методики заключается в воздействии на оболочку специальным разъедающим химическим раствором (кислый раствор Тироде), который микроинструментами наносят на ее небольшую область. В оболочке образуется небольшое отверстие диаметром 20 ± 7 мкм, после чего раствор убирают, а зародыш несколько раз промывают во избежание повреждающего воздействия агрессивного вещества на его клетки.

Хэтчинг с помощью лазерного излучения

Выполняется на микроманипуляционной установке тонким лазерным лучом, которым через оптическую линзу бесконтактным путем делают надсечки на оболочке (при помощи сквозного повреждения или локального ее истончения). Эта методика является точной, безопасной и эффективной, при этом наиболее оптимальным ее видом считается применение инфракрасных лучей диаметром 1480 нм.

Пьезо-методика

Это еще один из самых современных вариантов вспомогательного хэтчинга. Он осуществляется при помощи пьезоэлектрического микроманипулятора, имеющего высокочастотную микровибрацию, оставляющего конические углубления на ограниченном участке оболочки и тем самым способствующим ее истончению.

Что представляет собой редукция эмбрионов?

Редукция — это особая процедура, предназначенная для умерщвления и удаления из полости матки одного или нескольких имплантировавшихся эмбрионов. Ее рекомендуют проводить в тех случаях, когда в результате многоплодия здоровью матери или будущих детей грозит серьезная опасность. После проведения редукции ткани эмбриона остаются в матке и через несколько недель самостоятельно рассасываются.

Процедуру впервые начали осуществлять более 30 лет назад при выявлении серьезных патологий у эмбрионов: это дало возможность женщинам, вынашивающим нескольких детей, сохранять жизнь другим малышам. В конце 80-х годов прошлого века редукцию начали применять для удаления «лишних» жизнеспособных эмбрионов при экстракорпоральном оплодотворении — для снижения риска возможных осложнений, таких как:

преждевременные роды;
самопроизвольное прерывание беременности;
гибель всех эмбрионов;
патология развития эмбрионов;
смертность второго и последующих малышей во время родов.

Каким образом осуществляется редукция эмбрионов?

Редукция эмбриона при многоплодной беременности может проводиться на сроках от 5 до 13 недель беременности, однако наиболее оптимальным периодом считаются 8-9 неделя. Это связано с тем, что на ранних сроках один или несколько эмбрионов могут остановиться в развитии и самостоятельно исчезнуть (так называемый «синдром исчезнувшего близнеца») и тогда вмешательство станет ненужным. На более поздних сроках редукция возможна, но нежелательна, поскольку костные останки плода в полости матки будут долго рассасываться, что может привести к повышению тонуса ее мышц и самопроизвольному прерыванию беременности.

Выбор эмбрионов для удаления врач определяет по нескольким критериям:

наличие патологий развития;
наименьшие показатели копчиково-теменного размера (это означает, что он менее развит);
патологические размеры воротникового пространства;
наличие удобного доступа к эмбриону, исключающего контакт с другими эмбрионами, не подлежащими редукции.

Кроме того, врач оценивает состояние оставляемых эмбрионов, учитывает особенности их имплантации, строение плодных яиц, наличие желточных мешков, определяет толщину хориона.

Редукция эмрионов может быть проведена одним из трех методов:

Трансцервикальным (через канал шейки матки)

Осуществляется на ранних сроках (5-6 недель) и заключается во введении в цервикальный канал специального катетера, подключенного к вакуум-аспиратору. Под контролем УЗИ его подводят к плодному яйцу и уничтожают эмбрион, при этом введение матери в состояние наркоза не требуется.

Однако данный метод имеет ряд существенных недостатков:

любая травма шейки матки во время операции может спровоцировать выкидыш;
удалить можно только ближайшее к «выходу» плодное яйцо;
высока вероятность попадания микрофлоры влагалища через цервикальный канал в матку;
при редукции можно легко повредить соседнее плодное яйцо.

Поэтому сегодня редукцию трансцервикальным методом проводят редко.

Трансвагинальным

Проводится через влагалищена сроках 7-8 недель под общим наркозом под контролем ультразвукового датчика с помощью биопсийного адаптера (или иглы). Им делают прокол в стенке матки, затем вводят в область грудной клетки эмбриона и для остановки его сердечной деятельности делают инъекцию раствора хлорида калия.

Важные преимущества данного метода — минимальный риск травм для других эмбрионов и возможность применения на ранних сроках. Опасен он введением неправильно рассчитанной дозы лекарственного средства, что может навредить другим плодам.

Трансабдоминальный

Этот способ схож с трансвагинальным и отличается от него местом введения иглы (через переднюю брюшную стенку), а также сроками проведения — 8-13 недель беременности. Процедуру осуществляют под контролем УЗИ и местным наркозом. Этот метод имеет низкий риск инфицирования полости матки, он удобен при выборе любого эмбриона для редукции, поэтому сегодня наиболее распространен.

Однако, несмотря на то, что каждый из методов имеет свои достоинства и недостатки, проведение редукции любым из них может стать причиной разного рода осложнений дальнейшего течения беременности.

Вспомогательный хетчинг

Как только проблема получила четкое описание, началась разработка методов воздействия, соединяющих эффективность и безопасность.

В настоящее время существует несколько способов хетчинга эмбрионов:

химический— оболочку точечно растворяют с помощью раствора Тироде;
механический— в оболочке делают прорезь с помощью микроиглы;
пьезо-методика— вибрации, производимые пьезоэлектрическим микроманипулятором, увеличивают истончение оболочки;
лазерный.

Методом отбора некоторые из них были признаны недостаточно безопасными и постепенно вышли из употребления. Например, исследования в области химического хетчинга доказали, что такое воздействие представляет угрозу для зародыша вследствие высокой токсичности.

При механической манипуляции существует риск повредить клетки эмбриона. Из всех доступных способов самым безопасным на данный момент считается лазерный хетчинг, именно его применяют в большинстве клиник, занимающихся репродуктивными технологиями.

На какой день выполняют диагностику

В большинстве медицинских учреждений, специализирующихся на использовании вспомогательных репродуктивных технологий, предимплантационное обследование выполняется на 3 сутки. К этому времени количество клеток эмбриона достигает 8, что позволяет без ущерба для дальнейшего развития провести анализ. Некоторые клиники предпочитают выполнять исследование на 5 день, когда количество клеток превышает 100. Такой метод считается более точным, однако не дает достаточно времени для проведения расширенного анализа.

Анализ позволяет отобрать эмбрионы без генетических аномалий

В зависимости от вида протокола ЭКО специалисты индивидуально выбирают сроки проведения ПГД. Если предполагается криопротокол, то лучше выполнить биопсию на 5 сутки. В этом случае перенос эмбрионов планируют не ранее следующего цикла, что позволяет получить детальную информацию о генетическом материале и выбрать самые качественные клетки. Если протокол ЭКО не предполагает витрификации эмбрионов, то стоит сделать биопсию на 3 сутки развития зародыша.

У партнеров на этапе подготовке к экстракорпоральному оплодотворению часто возникают вопросы по поводу того, сколько делается ПГД и когда следуют перенос клеток. При стандартном протоколе без криоконсервации исследование проводится в сжатые сроки. Перенос эмбриона должен быть выполнен не позднее 5 дней его развития. Если биопсию взяли на 3 сутки, то у эмбриологов остается не больше 48 часов для генетического анализа.

Делать ли ПГД эмбриона

Предимплантационное обследование может быть проведено по желанию пары в протоколе экстракорпорального оплодотворения за свой счет.

Показания для выполнения ПГД:

рождение в прошлом ребенка, который имеет генетические отклонения;
наличие у родителей генетических заболеваний, которые имеют половую принадлежность;
возраст партнеров – женщин от 35 лет, а мужчины от 40;
неудачные попытки проведения ЭКО в анамнезе;
привычное невынашивание беременности, самопроизвольное прерывание на одинаковом сроке;
серьезные патологии спермы у мужчины, морфологические изменения в большинстве клеток;
риск резус-конфликта между матерью и будущим ребенком.

В каких случаях проводится хэтчинг?

Хэтчинг – это очень рутинная процедура, которая увеличивает шансы наступления беременности. Но применяется она не во всех случаях, так как многолетняя практика показывает, что эта процедура не всегда является необходимостью. В некоторых случаях просто нет смысла проведения хэтчинга.

Итак, к основным показаниям проведения данной процедуры относят:

беспрерывное курение женщины на протяжении долгих лет;
возраст старше 38 лет, так как именно в этом возрасте чаще всего происходят проблемы с наступлением беременности;
проведение нескольких процедур по экстракорпоральному оплодотворению, которые так и не принесли желаемых результатов;
низкие морфологические показатели эмбриона;
аномалии блестящей оболочки, в том числе и ее сильное уплотнение;
пересадка эмбрионов после процедуры криоконсервации (заморозки);
обнаружение высокого уровня фолликулостимулирующего гормона в крови у женщины.

Все это является прямой необходимостью проведения хэтчинга, так как именно эта процедура позволит увеличить шансы на наступление беременности, особенно при проведении ЭКО.

У женщин старше 38 лет в организме происходят гормональные изменения, которые влекут за собой появление проблем, связанных с наступление беременности. Это же может привести к утолщению оболочки эмбриона (она становится более 18 мкм), а также превышению показателей фрагментации бластомеров III и IV типа.

Бывает и такое, что в этом возрасте также происходит уменьшение бластомеров у эмбриона (их количество становится меньше 6), а это является прямым показанием для проведения хэтчинга.

Утолщение стенки оболочки

Причин не так много:

возраст. Стареет женщина — стареет репродуктивная система;
криоконсервация эмбрионов при экстракорпоральном оплодотворении. Стенки уплотняются при неоднократной заморозке и разморозке;
повышенный уровень гормона фоллитропина в состоянии покоя;
искусственное развитие плода. Среда культивации порой слишком слаба, то есть не способна создать необходимые условия и вещества;
гормональная стимуляция, длящаяся долго.
есть также и шестая, банальная причина и одновременно веский аргумент против вредных привычек — курение. Самое время вспомнить многочисленные наставления дома, в школах и в университетах о вреде курения и мотать на ус.

Все вышесказанное становится непреодолимым препятствием к желанию забеременеть, будь то естественный путь или искусственный. Если эти пункты про вас, то врач с соглашения пациента дает добро на процедуру.

На оболочку направляют пучки инфракрасного излучения. Лазерный способ выполнения этой процедуры используется чаще всех, и он эффективен по причине наибольшего числа успешных относительно всех проведенных. Способ делится на 2 метода: бесконтактный и контактный. При бесконтактном инфракрасный луч направлен по касательной относительно оболочки, а при контактном — прямо на нее, создавая сквозное отверстие. Процедура выполняется с помощью точного лазера. Отсутствие отрицательных результатов при ЭКО доказывают его безопасность.

Вспомогательный хетчинг считают очень длительной и нудной процедурой. Параллельно процент успеха зависит от пациентки, поэтому луч надежды коснется не каждой женщины. Исследования хетчинга проводили многократно, и зачастую доказывали: в одних ситуациях это единственная панацея, а в других он не имеет смысла, потому что ни на что не повлиял. В итоге результаты исследований свелись к нескольким показаниям, при которых хетчинг имеет смысл в процессе ЭКО:

Женщина должна быть старше 38 лет;
Неудачные попытки ЭКО до решения провести процедуру;
Стенка оболочки утолщена по одной из причин выше;
Зашкаливающий уровень гормона фоллитропина в крови;

Возможные осложнения

Как показывает практика, хэтчинг является безопасной процедурой. Осложнения наступают лишь в очень редких случаях (только у 1% пациенток). При надсечке блестящей оболочки возможно повреждение эмбриона, что приведет к остановке его развития и рассасыванию.

Даже если надсечка оболочки прошла успешно, врачи не дают 100% гарантии наступления беременности. Так как эмбрион может не прижиться.

Других осложнений не наблюдалось. У всех женщин, которые успешно забеременели после хэтчинга, беременность протекала без осложнений, а дети по своему умственному и физическому развитию ничем не отличались от своих сверстников.

Хэтчинг – это современная процедура, которая тщательно разработана учеными и по сей день усовершенствуется. Если ваш врач советует ее провести, не стоит пренебрегать его рекомендациям, а лучше согласится на проведение процедуры. Ведь шансы в данном случае забеременеть очень велики, тем более что осложнения после хэтчинга наблюдаются крайне редко.

Причины затруднения выхода эмбриона из оболочки

Яйцеклетка человека на разных стадиях развития окружена внеклеточной оболочкой (zona pellucida). В процессе оплодотворения она играет важнейшую роль. На поверхности оболочки расположены рецепторы узнавания сперматозоидов и связывания их с яйцеклеткой.

В дальнейшем зона пеллюцида выполняет защитную функцию, обеспечивая безопасное прохождение эмбриона по маточным трубам. Также благодаря ей на стадии морулы происходит компактизация бластомеров. В стадии бластоцисты можно наблюдать истончение зоны пеллюцида.

Через 120 часов после овуляции происходит хетчинг бластоцисты, то есть освобождение эмбриона от оболочки, а затем и прикрепление его в эндометрий матки.

Совсем недавно специалисты считали, что в процессе хетчинга основную роль осуществляет давление растущей бластоцисты, однако уже доказано, что немаловажную роль играет и маточное окружение.

Следовательно, в лабораторных условиях (in vitro) культивирование эмбрионов, присутствие в культуральной среде ингибиторов протеиназ значительно тормозит хетчинг, а отсутствие в ней некоторых лизинов может привести к затвердеванию зоны пеллюцида. Состав культуральной среды и является первой причиной невозможности освобождения эмбриона от оболочки.

Второй причиной, и самой часто встречаемой у пациенток с диагнозом бесплодие, можно назвать возрастные изменения в организме женщины. У пациенток старшей группы всё чаще специалисты отмечают интенсивное затвердевание зоны пеллюцида, вероятно это обусловлено эндокринными изменениями. По сути, происходит преобразование гликопротеинов в оболочке, что и приводит к повышенной стойкости зоны пеллюцида и невозможности её расщепления под действием литических ферментов. То есть, даже морфологически нормальная бластоциста навсегда остаётся в «заложниках» у оболочки.

В условиях культивирования эмбрионов in vitro эмбриологи довольно часто отмечают ещё одну не менее популярную причину, при которой отсутствует хетчинг – это криоконсервация ооцитов и эмбрионов. В большинстве случаев криоконсервация влияет на молекулярные изменения (гликопротеины) в зоне пеллюцида, что также приводит к её затвердеванию.

Ну и, конечно же, самая сложная и малоизученная причина, при которой отсутствует хетчинг – это гормональные изменения в организме пациентки, связанные с прохождение курса лечения по поводу бесплодия, своего рода замкнутый круг. В первом случае вырабатывающиеся яйцеклетки экспрессируют дефектный лизин, либо же его пониженный уровень, что в сочетании с условиями культивирования in vitro приводит к неспособности эмбриона освободиться от оболочки.

Во втором случае гормональные препараты, назначенные пациентке с целью стимуляции яичников, могут влиять на низкую частоту имплантации эмбрионов. Обусловлено это тем, что наступает асинхронность между развитием эмбриона и днём «Х» (днём имплантации эмбриона в полость матки).

Проще говоря, естественный хетчинг происходит на пятые сутки (примерно через 120 часов) после оплодотворения яйцеклетки. В это же время в эндометрии матки вырабатывается пиноподий, который способствует прикреплению эмбриона в полость матки, и продолжительность его присутствия примерно 48 часов. Следовательно, в естественном нестимулируемом цикле эмбрион может имплантироваться в определённом промежутке времени (окно имплантации от 120 до 168 часов после оплодотворения ооцита).

Если же говорить о стимулируемом цикле, то окно имплантации эмбриона сдвигается, пиноподий присутствует в эндометрии матки от 72 до 120 часов. Соответственно, если хетчинг эмбриона происходит через 120 часов, то у эмбриона практически не остаётся времени для имплантации в полость матки. Это и называется асинхронность между развитием эмбриона и готовностью матки его принять.